Deney Hayvanı Olarak Gerbiller (Meriones unguiculatus): Leishmania major için İyi Bir Rol Model Olabilir mi?
Tarih
2015Yazar
SERKAN BAKIRCI;HÜSEYİN BİLGİN BİLGİÇ;ONUR KÖSE;Ayça AKSULU;Selin HACILARLIOĞLU;TÜLİN KARAGENÇ;İbrahim ÇAVUŞ;AHMET ÖZBİLGİN
Üst veri
Tüm öğe kaydını gösterÖzet
Amaç: Bu çalışma, deneysel olarak enfekte edilen gerbillerde (Meriones unguiculatus), klasik tanıdaki smear örnekleri yanında zenginleştirilmiş Novy-MacNeal-Nicolle (NNN) besiyerine ekim ve Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PZR) testi kullanılarak, Leishmania major amastigotlarının yayılabilme ve visseralize olabilme olasılıklarının gözlenmesi amacı ile gerçekleştirilmiştir.Yöntemler: Çalışmada kullanılan L.major suşu Bitlis ilimiz kırsalında yaşayan ve 18 yaşında olan erkek hastadan izole edilmiştir. Gerbillerin enfeksiyonu için de bu suştan faydalanılmıştır. 10 adet gerbile toplam 1×108/mL dozda promastigot inokule edilmiştir. Enfeksiyonun visseralize olup olmadığı yönünden incelenmesi amacıyla hayvanlara ötenazi uygulanarak nekropsileri yapılmıştır. Nekropside tüm iç organlardan preparatlar hazırlanarak Giemsa ile boyanmış ve promastigot gelişimi için NNN besiyerine ekimler yapılmıştır. Bununla birlikte enfeksiyonu doğrulamak için gerçek zamanlı PZR testi uygulanmıştır.Bulgular: Enfeksiyondan sonraki ilk ayda, L. major ile enfekte edilmiş hayvanlardan alınan ve Giemsa ile boyanan doku örneklerinin muayenesinde, tüm dokularda (karaciğer, dalak, akciğer, böbrek, kalp, testis), Leishmania amastigotlarına rastlanılmış ve yapılan NNN besiyeri ekimlerinde 26°C'de Leishmania promastigotlarının ürediği görülmüştür. Leishmania parazitlerinin ribozomal internal transcribed spacer 1 (ITS1) bölgesine özgü tasarlanan primer ve problar ile gerçek zamanlı PZR testi yardımıyla gerbillerden alınan örneklerin L. major parazitine uygun erime eğrisi gösterdiği görülmüştür.Sonuç: Çalışma neticesinde, Zoonotik Kutanöz Leishmaniasis etkeni olan L.major'un gerbillerde visseralize olduğu hem giemsa ile boyalı preparatlarda, hem de PZR ile doğrulanmıştır. Objective: This study aimed to observation the possible visceralization tendency and dissemination of L. major amastigotes in gerbils (Mer-iones unguiculatus) using a classic smear technique, inoculated into enriched Novy-MacNeal-Nicolle (NNN) culture and polymerase chain reaction (PCR) assay for diagnosis of infection.Methods: In this study, L. major isolated from a man who 18 years old, living in Bitlis province of Turkey. This strain also was utilized to infect gerbils. A total of 1×108/mL promastigotes were inoculated to 10 gerbils. Necropsy was performed on infected gerbils for monitoring the visceralization tendency of the parasites. Tissue samples were prepared from each animal and stained by Giemsa and inoculated into NNN culture. However, a real-time PCR assay was performed to confirm the infection the clinical material. Results: Examination of Giemsa-stained tissue smears showed that infected animals with L.major were positive for Leishmania amastigotes in all tissues at the first month post infection and Leishmania promastigotes were cultured at 26°C in culture flasks containing NNN. Melting curve analyses of ribozomal internal transcribed spacer 1 (ITS-1) PCR showed the peak concordant with L. major.Conclusion: As a result, the present study confirmed by both Giemsa-stained smears and PCR, visceralization and dissemination of L. major amastigotes, the principal cause of zoonotic cutaneous leishmaniasis in gerbils.
Bağlantı
https://app.trdizin.gov.tr/publication/paper/detail/TVRrM09ESXpNdz09http://hdl.handle.net/20.500.12481/2662
Koleksiyonlar
- TR - Dizin [3877]